date:2024-03-15 13:00:13
本篇我們將探討在不同研究領(lǐng)域使用ibidi μ-Slide Chemotaxis進(jìn)行的5項(xiàng)最新研究。
在本篇文章中，我們將探索跨越不同領(lǐng)域的5種不同的檢測(cè)趨化性的實(shí)驗(yàn)方法:
* 納米技術(shù)
* 癌癥研究
* 轉(zhuǎn)化研究
* 神經(jīng)生物學(xué)
* 基于RNAi的方法
通過(guò)使用我們ibidi的μ-Slide Chemotaxis載玻片進(jìn)行實(shí)時(shí)可視化，這些研究將為您提供對(duì)細(xì)胞反應(yīng)的動(dòng)態(tài)洞察，并為您定制自己的趨化性分析提供一個(gè)強(qiáng)大的框架。從而激發(fā)新的視角，推動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的創(chuàng)新戰(zhàn)略。
概述
趨化性是細(xì)胞對(duì)化學(xué)信號(hào)的反應(yīng)，是生物學(xué)中的一個(gè)基本現(xiàn)象，具有深遠(yuǎn)的意義。不同領(lǐng)域的研究人員利用這一過(guò)程來(lái)探索細(xì)胞行為、免疫反應(yīng)和發(fā)育機(jī)制。在癌癥研究中，趨化性揭示了細(xì)胞如何導(dǎo)航其環(huán)境，從而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。在免疫學(xué)中，趨化性將免疫細(xì)胞引導(dǎo)到感染部位。除了基礎(chǔ)研究之外，了解這一現(xiàn)象在醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)中也有應(yīng)用。
在本文中，我們將探討研究論文，重點(diǎn)介紹研究趨化性的不同方法。這些研究的重點(diǎn)是實(shí)時(shí)可視化，提供對(duì)細(xì)胞反應(yīng)的動(dòng)態(tài)見(jiàn)解。實(shí)時(shí)測(cè)量捕獲關(guān)鍵事件和動(dòng)力學(xué)，與終點(diǎn)方法相比，從而提供對(duì)趨化運(yùn)動(dòng)的全面了解。這使研究人員能夠揭示影響我們理解這一基本生物現(xiàn)象的復(fù)雜細(xì)節(jié)。
點(diǎn)ibidi細(xì)胞趨化實(shí)驗(yàn) 查看操作視頻
1. 納米粒子作為“分子敲除”破壞趨化性[參考文獻(xiàn)1]
在這項(xiàng)跨學(xué)科研究中，Zhang等人探索了納米顆粒(NPs)通過(guò)“分子敲除”破壞趨化性的潛力。該研究旨在驗(yàn)證NPs可以有效吸附趨化劑分子，從而降低其生物利用度，從而抑制趨化性的假設(shè)。該實(shí)驗(yàn)利用了一個(gè)成熟的涉及人類(lèi)單核細(xì)胞系THP-1及其化學(xué)引誘劑單核細(xì)胞化學(xué)引誘蛋白-1(MCP-1)的模型系統(tǒng)。
利用與MCP-1具有不同預(yù)測(cè)相互作用的金納米顆粒(AuNPs)庫(kù)，該研究在趨化性分析中模擬了細(xì)胞外基質(zhì)的體內(nèi)3D環(huán)境。研究結(jié)果強(qiáng)調(diào)了化學(xué)引誘劑吸附對(duì)納米顆粒的深遠(yuǎn)影響，改變了它們?cè)诩?xì)胞附近的濃度并驅(qū)動(dòng)了細(xì)胞行為的變化，而所有這些都不需要納米顆粒物理進(jìn)入細(xì)胞。這種創(chuàng)新的方法提供了對(duì)NPs如何作為分子調(diào)節(jié)劑的理解，為研究和操縱趨化反應(yīng)的新策略開(kāi)辟了途徑。
2. NET-DNA作為癌癥轉(zhuǎn)移的動(dòng)態(tài)趨化因子[參考文獻(xiàn)2]
Yang等人的這項(xiàng)研究探討了中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)(neutropl Extracellular Traps, NETs)及其在癌癥轉(zhuǎn)移中的作用。net是由DNA、蛋白質(zhì)和組蛋白組成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，由中性粒細(xì)胞釋放，用于捕獲和中和病原體。該研究揭示了乳腺癌和結(jié)腸癌患者肝轉(zhuǎn)移灶中NETs的豐富程度，挑戰(zhàn)了NETs僅作為微生物陷阱的傳統(tǒng)觀念。相反，NET-DNA作為NETs的一個(gè)組成部分，作為一種動(dòng)態(tài)趨化因子出現(xiàn)，積極吸引癌細(xì)胞促進(jìn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的形成。
通過(guò)使用Transwell和μ-Slide Chemotaxis測(cè)定進(jìn)行細(xì)致評(píng)估，該研究證實(shí)了NET-DNA促進(jìn) MDA-MB-231三陰性乳腺癌細(xì)胞遷移和粘附的顯著能力。細(xì)胞遷移的劑量依賴性增強(qiáng)進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了這種效應(yīng)，這種現(xiàn)象在用DNase I處理后被消除。μ-Slide Chemotaxis測(cè)定證實(shí)了這些發(fā)現(xiàn)，揭示了MDA-MB-231細(xì)胞向更高的NET-DNA梯度的有效遷移。這些發(fā)現(xiàn)為理解免疫反應(yīng)、NET和癌癥進(jìn)展之間復(fù)雜的相互作用開(kāi)辟了新的途徑，為轉(zhuǎn)移性疾病的治療干預(yù)提供了潛在的靶點(diǎn)。
3. Prokineticin-2在CNS損傷星形膠質(zhì)細(xì)胞趨化中的作用[參考文獻(xiàn)3]
在這項(xiàng)神經(jīng)生物學(xué)研究中，Neal等人揭示了Prokineticin-2 (PK2)（一種趨化因子樣信號(hào)蛋白）的新維度。他們的發(fā)現(xiàn)揭示了其在促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞趨化性方面的關(guān)鍵作用——這是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）損傷的一個(gè)重要機(jī)制。當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)受傷或患病時(shí)，星形膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)被激活并遷移到受損部位，從而促進(jìn)再生反應(yīng)?；赑K2已知參與巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞等系統(tǒng)細(xì)胞類(lèi)型的激活和遷移，該研究探討了PK2是作為星形膠質(zhì)細(xì)胞的趨化因子。
使用ibidi µ-Slide Chemotaxis和U373人星形細(xì)胞瘤細(xì)胞系，研究人員證實(shí)PK2確實(shí)可作為趨化因子，顯著增強(qiáng)星形膠質(zhì)細(xì)胞的遷移。在重組PK2 (rPK2)存在的情況下，觀察到正向遷移指數(shù)(yFMI) 明顯增加，這強(qiáng)調(diào)了對(duì)含有PK2的儲(chǔ)層的明確定向響應(yīng)。這種遷移的方向性增強(qiáng)伴隨著遷移速度和方向性得分的顯著增加，強(qiáng)調(diào)了PK2作為星形細(xì)胞趨化性刺激因子的影響作用。
了解更多有關(guān)µ-Slide Chemotaxis的實(shí)驗(yàn)工作流程可點(diǎn)擊查看Experimental Workflow of a Chemotaxis Assay
4. 血小板裂解物負(fù)載PEG水凝膠誘導(dǎo)干細(xì)胞趨化性[參考文獻(xiàn)4]
在這項(xiàng)轉(zhuǎn)化研究中，Chahal等人研究了載人血小板裂解物(PL)的聚乙二醇（PEG）水凝膠在體外誘導(dǎo)干細(xì)胞趨化的潛力。血小板裂解物含有多種已知介導(dǎo)細(xì)胞活性的蛋白質(zhì)和生長(zhǎng)因子，其中一些被鑒定為能夠誘導(dǎo)細(xì)胞遷移的化學(xué)引誘劑。該研究探索了使用摻入90 vol% PL的PEG水凝膠來(lái)檢測(cè)其對(duì)人類(lèi)間充質(zhì)干細(xì)胞（hMSCs）的遷移影響。
使用μ-Slide Chemotaxis進(jìn)行細(xì)胞遷移研究。跟蹤細(xì)胞軌跡和遷移參數(shù)顯示，hMSC表現(xiàn)出向負(fù)載 PL 的水凝膠的定向遷移，與對(duì)照組相比，顯示出更高的速度和直接性。這項(xiàng)研究強(qiáng)調(diào)了負(fù)載PL的PEG水凝膠的生物活性潛力，展示了其吸引干細(xì)胞的能力——這是內(nèi)源性組織工程應(yīng)用的一個(gè)令人興奮的前景。
5. RAB35在定向運(yùn)動(dòng)和趨化性中的作用[參考文獻(xiàn)5]
在這項(xiàng)關(guān)鍵研究中，Corallino等人揭示了RAB35在控制最佳方向運(yùn)動(dòng)和趨化性方面不可或缺的作用。利用基于RNAi的方法，該研究將RAB35確立為協(xié)調(diào)這些基本細(xì)胞過(guò)程的關(guān)鍵要求。
Sticky-Slide Chemotaxis（貨號(hào)：80328）
為證實(shí)這一觀點(diǎn)，該研究深入研究了對(duì)照和RAB35沉默的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)在血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)梯度中通過(guò)精心設(shè)計(jì)的柱陣列的遷移行為。該微柱陣列由光固化雜化聚合物組成，并以4μm的間距隔開(kāi)，粘附在sticky-Slide Chemotaxis 細(xì)胞趨化可粘載玻片的自粘底面的中心區(qū)域。從細(xì)胞儲(chǔ)液池入口區(qū)域策略性地接種細(xì)胞，并在細(xì)胞出口區(qū)域以20ng/ml的濃度引入趨化劑(PDGF)。用倒置顯微鏡觀察記錄細(xì)胞的動(dòng)態(tài)運(yùn)動(dòng)。
對(duì)照細(xì)胞組表現(xiàn)出功能性RAB35通路，顯示出對(duì)PDGF梯度的定向趨化性。這些細(xì)胞延伸出持久的遷移突起，主要與梯度方向一致排列。形成鮮明對(duì)比的是，RAB35的缺失顯著損害了趨化性，同時(shí)減少了沿梯度方向突出的細(xì)胞數(shù)量。通過(guò)延時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，并通過(guò)趨化和遷移工具分析手動(dòng)跟蹤的細(xì)胞。這種綜合實(shí)驗(yàn)方法強(qiáng)化了RAB35在響應(yīng)趨化信號(hào)而控制細(xì)胞定向運(yùn)動(dòng)方面的關(guān)鍵作用，為了解這些基本細(xì)胞過(guò)程背后的分子復(fù)雜性提供了寶貴的見(jiàn)解。
結(jié)論
這些研究對(duì)細(xì)胞響應(yīng)化學(xué)信號(hào)的行為進(jìn)行了引人入勝的探索，跨越不同的領(lǐng)域，比如; 納米技術(shù)、癌癥研究、轉(zhuǎn)化研究、神經(jīng)生物學(xué)和基于RNAi的方法?？偟膩?lái)說(shuō)，這些研究不僅促進(jìn)了趨化性研究的發(fā)展，而且激發(fā)了新的視角和方法，推動(dòng)了醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的創(chuàng)新戰(zhàn)略。
有關(guān)如何進(jìn)行趨化性測(cè)定和分析結(jié)果的更多詳細(xì)，可點(diǎn)擊#細(xì)胞趨化進(jìn)行查看相關(guān)文章或聯(lián)系我們?cè)斣儯?/p>
1.Zhang, X., P. Falagan-Lotsch, and C.J. Murphy, Nanoparticles Interfere with Chemotaxis: An Example of Nanoparticles as Molecular "Knockouts" at the Cellular Level. ACS Nano, 2021. 15(5): p. 8813-8825.
2.Yang, L., et al., DNA of neutrophil extracellular traps promotes cancer metastasis via CCDC25. Nature, 2020. 583(7814): p. 133-138.
3.Neal, M., et al., Prokineticin-2 promotes chemotaxis and alternative A2 reactivity of astrocytes. Glia, 2018. 66(10): p. 2137-2157.
4.Chahal, A.S., et al., Human Platelet Lysate-Loaded Poly(ethylene glycol) Hydrogels Induce Stem Cell Chemotaxis In Vitro. Biomacromolecules, 2021. 22(8): p. 3486-3496.
5.Corallino, S., et al., A RAB35-p85/PI3K axis controls oscillatory apical protrusions required for efficient chemotactic migration. Nat Commun, 2018. 9(1): p. 1475.
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